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笔颁搁试剂盒

笔颁搁试剂盒

简要描述:笔颁搁试剂盒用于常规PCR,高保真PCR,热启动PCR,多重PCR等实验应用.高性能的pcr试剂盒 助您快速获得高质量PCR扩增结果.

产物型号:

所属分类:笔颁搁试剂盒

更新时间:2024-01-26

详细说明:

笔颁搁试剂盒

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增巴斯德氏杆菌属,与其他微生物没有交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

规格及成分

成分

编号

十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0

试剂一

1 mL(红盖)

超纯水

试剂二

1 mL(亮黄色)

巴斯德氏杆菌属笔颁搁引物混合液

试剂叁

100 μL(白盖)

巴斯德氏杆菌属PCR 阳性对照

(1×10E8 拷贝/μL)

试剂四

50 μL(黄盖)

核酸释放剂(试用装)

试剂五

20 次(1 mL,绿盖)

使用手册

试剂六

1 份

运输及保存低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂样品 DNA。

笔颁搁试剂盒使用方法:

 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂

2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

N+2 个样品管

PCR 阴性对照

PCR 阳性对照

PCR MagicMix 3.0

各 20 μL

20 μL

20 μL

巴斯德氏杆菌属笔颁搁引物混合液

各 2 μL

2 μL

2 μL

N+2 个样品 DNA 模板

各 18 μL

--

--

PCR 阴性对照(水)

--

18 μL

--

PCR 阳性对照(巴斯德氏杆菌属PCR阳性对照的 1000

倍稀释液)

--

--

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR 反应(35 个循环)

95℃

15 sec

57℃

15 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

10 min

叁、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产物提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

 

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