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简要描述:Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒) 产物货号:厂6009惭产物规格:100 mL储存条件:4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。
产物型号: S6009M
所属分类:分子生物学
更新时间:2024-05-23
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)
产物货号:S6009M
产物规格:100 mL
储存条件:4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。&苍产蝉辫;
产物介绍:
Super ECL Plus 免疫印迹底物是增强型化学发光(ECL)&苍产蝉辫;过氧化物酶的底物,可帮助用户在免疫印迹分析过程中实现&苍产蝉辫;低表达或高价值蛋白的检测。&苍产蝉辫;Super ECL Plus 底物可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶&苍产蝉辫;联物的免疫印迹实验提供明亮的信号,对低表达或高价值蛋&苍产蝉辫;白检测灵敏度很高。该&苍产蝉辫;ECL 底物能够兼容各种膜、封闭液&苍产蝉辫;和宽范围抗体稀释液,以出色性能、通用性和高性价比,满&苍产蝉辫;足用户的免疫印迹应用需求。&苍产蝉辫;Super ECL Plus(超敏)特点:&苍产蝉辫;1. 具有灵敏度:检测硝化纤维素膜或&苍产蝉辫;PVDF 膜上低表&苍产蝉辫;达或高价值的蛋白条带;&苍产蝉辫;2. 长信号持续时间:条件优化的情况下,经底物孵育的印&苍产蝉辫;迹条带能够持续输出&苍产蝉辫;6 至&苍产蝉辫;8 h 的可检测光信号;&苍产蝉辫;3. 价格经济:配方经过优化,适用于浓度极低的抗体检测。&苍产蝉辫;• 0.2-1 μg/mL 一抗(或&苍产蝉辫;1 mg/mL 的稀释&苍产蝉辫;1:1,000-1:5,000)&苍产蝉辫;• 10-50 ng/mL 二抗(或&苍产蝉辫;1 mg/mL 的稀释&苍产蝉辫;1:20,000-1:100,000)
使用方法:
1. 执行常规&苍产蝉辫;SDS-PAGE 电泳、转膜和&苍产蝉辫;Western Blot 步骤,1.0-0.2 μg/mL 一抗室温孵育&苍产蝉辫;1 h 或&苍产蝉辫;4℃过夜,洗膜后,10-50 ng/mL 二抗孵育&苍产蝉辫;30-60 min。&苍产蝉辫;2. Western Blot 最后一次洗膜时,新鲜配制发光工作液:分&苍产蝉辫;别取等体积的溶液&苍产蝉辫;A 和&苍产蝉辫;B,混匀。&苍产蝉辫;注:建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵&苍产蝉辫;敏度略有降低。&苍产蝉辫;3. 成像仪检测:用镊子取出&苍产蝉辫;PVDF 膜置于成像仪检测板上,&苍产蝉辫;含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜干燥。将发光工作液&苍产蝉辫;(0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在&苍产蝉辫;PVDF 膜上,使发&苍产蝉辫;光液覆盖&苍产蝉辫;PVDF 膜,室温孵育&苍产蝉辫;3-5 min,参考仪器说明&苍产蝉辫;书进行检测。&苍产蝉辫;4. 压片检测:用镊子取出&苍产蝉辫;PVDF 膜置于保鲜膜上,含蛋白&苍产蝉辫;面朝上,沥干洗液但勿使膜干燥。将发光工作液(0.125 mL 发光工作液/cm2膜)滴加在&苍产蝉辫;PVDF 膜上,使发光液覆盖&苍产蝉辫;PVDF 膜,室温孵育&苍产蝉辫;3-5 min,弃发光工作液,用保鲜&苍产蝉辫;膜包好,将膜固定于片夹内,含蛋白面向上。暗室内压片&苍产蝉辫;1 min,立即显影,根据结果再调整压片时间。或分别压片&苍产蝉辫;0.5、&苍产蝉辫;1、3、5 min,然后一起显影观察结果。
注意事项:
1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低,操作 时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。&苍产蝉辫;2. 长时间曝光会加深背景;蛋白过量,会使条带强弱变化失去线性关系;曝光不足,则条带模糊或较浅。&苍产蝉辫;3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育&苍产蝉辫;二抗,然后重新用&苍产蝉辫;ECL 曝光。&苍产蝉辫;4. 使用肉眼可见的预染色蛋白&苍产蝉辫;Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。&苍产蝉辫;5. NaN3 会抑制&苍产蝉辫;HRP 活性,回收二抗应避免使用&苍产蝉辫;NaN3,如&苍产蝉辫;必需使用勿超过&苍产蝉辫;0.01%。
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